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巴氏染色液染色的zui后一步是透明,使細胞的色度與細胞的重疊不致影響鏡下檢查。這是在脫水與制片封固之間的一項重要步驟。zui常用的透明溶劑使二甲苯,二甲苯的折射率在1.494,載玻片的折射率在1.515,兩者較為匹配。如果二甲苯溶液出現(xiàn)顏色或變得渾濁,一定要更換新液。
巴氏染色液操作流程 95%乙醇固定(15min)→清水沖洗多次→蘇木素染液(3-5min)→清水沖洗三次→藍化→95%乙醇漂洗→橙黃染液(1-10s)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50(3-5m)→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→無水乙醇漂洗→無水乙醇(2min)→二甲苯(2min)→中性樹膠封片。三明市和眾生物技術有限公司歡迎您.
巴氏染色液固定方法濕固定法:作為用95%酒精固定液固定的細胞學標本一定使用濕固定法。制片制備完后,趁標本新鮮而又濕潤時,立即放入盛有95%酒精的固定缸內。制片在固定液內至少保持15-30min。固定時間通常不超過1周。這種制片染色后,顏色鮮艷,結構清晰。如果細胞制片需要送至另一實驗室或郵寄他處染色時,可以固定15min后,把制片取出后立即密封的容器中或者使用甘油防止制片干燥。因為無論固定前或固定后的制片,如果發(fā)生干燥后都會影響染色的效果。
巴氏染色液固定注意事項固定液的過濾:為了防止細胞污染,凡是使用過的固定液,必須過濾后才能再使用。使用過長的固定液,必須用酒精相對密度計測定,酒精濃度低于90%時應該及時更換新液。濕固定的重要性:標本再新鮮時及時固定時保證染色效果的重要因素。如蘇木素對細胞核的染色,巴氏染色中胞漿的特殊著色作用,均可因標本干燥后固定而大受影響。制片標本的郵寄:標本再固定15min后取出,立即加甘油數(shù)滴于制片上,裝入密封的小盒中。實驗室在收到標本后,先浸入95%酒精中,使甘油溶去,再進行染色。,為您提供更多的知識.